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产品名称: Hieff NGS™ RNA Cleaner

新品推荐:产品名称: Hieff NGS™ RNA Cleaner 添加时间:2018-3-4 23:40:48

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

Hieff NGSTM RNA Cleaner

12602ES01

1 mL

2-8℃保存

366.00

12602ES08

5 mL

2-8℃保存

1066.00

12602ES56

60 mL

2-8℃保存

4266.00

12602ES75

450 mL

2-8℃保存

38566.00

产品描述

本试剂盒利用独特的磁珠与缓冲液系统,可以特异性地吸附RNA,有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本,体外转录的RNA产物,RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!

使用方法

所需额外试剂:

100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free离心管。

实验前准备:

(1)将RNA clean beads 从4 ℃取出,平衡至室温(约30 min)。

(2)在一个Nuclease free PCR管中,用Nuclease-free水将0.5-5 μg总RNA稀释至50 μL。

RNA纯化:

(1)颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀,吸取2×磁珠(100 μL)加入总RNA样品中(50 μL),用移液器吹打6次充分混匀。

(2)室温孵育5 min,使RNA结合到磁珠上。

(3)将样品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。

(4)保持样品置于磁力架上,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。

【注】1)漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制,以防止引入RNase酶导致RNA降解。

      2)建议在该轮漂洗后,室温静置2 min,再进行下一轮漂洗,有助于提升RNA回收效率。

(5)重复步骤4,共漂洗2次。

(6)保持样品始终处于磁力架上,开盖空气干燥磁珠5 min。

【注】磁珠开盖晾干时要避免过分干燥,如果磁珠出现龟裂,则提示磁珠过分干燥,此时RNA的洗脱效率会降低。

(7)将样品从磁力架上取出,加入21 μL Nuclease-free 水,用移液器吹打6次以充分混匀,室温静置5 min。

(8)将样品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心转移上清20 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。

【注】建议转移上清时留2-3 μL液体,以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定,建议尽快进入下一步。若

要保存,请置于-80℃保存。

 注意事项

1)磁珠使用前务必平衡至室温后混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2)操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。

3)80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。

4)本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

5)为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。

结果展示:

使用总RNA纯化试剂盒纯化前后,RNA样品qRT-PCR Ct值变化

RNA样品

小鼠

拟南芥

检测基因

Gapdh

β-actin

Gapdh

β-actin

PP2A

TUB2

纯化前Ct值

12.92

12.36

18.74

18.53

24.33

22.2

纯化后Ct值

12.32

11.89

17.62

17.91

23.38

21.35

【注】使用Hieff NGSTM RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂,让检测结果更加真实。