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产品名称: Hieff NGS™ Smarter DNA Clean Beads

新品推荐:产品名称: Hieff NGS™ Smarter DNA Clean Beads 添加时间:2018-3-4 23:37:35

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Taq DNA Ligase

11051ES80

1000 U

346.00

Taq DNA连接酶(Taq DNA Ligase)

11051ES84

2000 U

656.00

Taq DNA连接酶(Taq DNA Ligase)

11051ES92

10000 U

2616.00

产品描述

Taq DNA Ligase是一种耐高温连接酶,它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子,在45℃-65℃范围内均有活性。

产品组分

编号

组 分

产品编号/规格

11051ES80 (1000 U)

11051ES84 (2000 U)

11051ES80 (10000 U)

11051-A

Taq DNA Ligase(40 U/µL)

25 μL

50 μL

5×50 μL

11051-B

10×Taq DNA Ligase Buffer(含NAD+

250 μL

500 μL

5×500 μL

来源

重组E. coli 菌株,含有从Thermus aquaticus HB8中克隆的连接酶基因。

产品应用

1)用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;

2)通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变;

3)同源重组。

单位定义

在50 μL 反应体系中,45℃条件下,孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制

核酸内切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液与0.5 μg pENZuC DNA作用,37℃孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,无肉眼可见的环状切口DNA出现。

核酸外切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液和10000 cpm/μg放射性标记的DNA作用,37℃孵育4 h,溶液中可溶性TCA的释放量小于5.0%。

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存。长时间(大于30天)保存时,缓冲液应于-80℃保存。

使用方法

1)反应体系配制:

组分

用量

DNA

up to 1 µg

10×Taq DNA Ligase Buffer

5 μL

Taq DNA Ligase(40 U/µL)

2 μL

ddH2O

up to 50 μL

2)反应条件:45℃温育15 min。加入终止染液(50%甘油,50 mM EDTA和溴酚兰)终止反应。

注意事项

1)10×Taq DNA Ligase Buffer中含有辅酶因子NAD+,为了延长NAD+的半衰期,Buffer应于-80℃储存;

2)Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase;

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。